⑴ 如何提高凝胶回收目的dna的产率
有好几年没做实验了,不过我对1楼的回答有些疑问,现在有能做23000bp这么长的专PCR?似乎我印象中属PCR要这么长的长度本身就很难能全长扩增吧。
那么如果我的理解没错的话,楼主是不是直接从土壤的细菌里头直接提取DNA。(呵呵,我也忘了细菌DNA大概多长),跑了一次电泳,然后把目的片断割下来,再纯化,再跑电泳,发现纯化之后的片断比目的片断小了。
检测回收率,你可以在DNA溶解液过柱之后,柱子洗脱之前在柱子上加试剂盒溶解液,吹打几次吸取一些溶液A,同时吸取一些离心下来的溶液B,再将过柱后的洗脱液C,以及未过柱前的溶液D(如果浓度太低,可相应浓缩)肆个溶液再上一次凝胶电泳,一切都将看得明明白白,究竟你在过柱的这个过程中,DNA到底留在了什么地方。
我相信有这个电泳图的话,应该可以很容易理解问题所在了。当然问题有可能象1楼所说的那样,天根的产品不过关(或者是你自己没有选对),那就换柱子!
⑵ 为什么要胶回收,而不直接用剩下的产物测序
要交会说不用,只产生的产物测序胶回收的话可以比较好的学完用这个交,然后不会产生浪费和污染。系统破坏。
⑶ PCR产物电泳做胶回收不也得到纯化的目的PCR产物纯化试剂盒的好处是什么
PCR产物纯化试剂盒去除的是PCR反应体系中的离子、dNTP、引物以及聚合酶,收集其中的DNA片段。这回只适合于几乎答没有非特异性条带的PCR产物的收集。如果你的PCR产物具有非特异性条带,那么一定需要使用胶回收试剂盒。
⑷ 胶回收及目的基因与t载体连接反应中为什么要有对照
连接反应中一般要设置阴性对照和阳性对照。设置阴性对照是为了防止载体自连,设置阳性对照是为了防止整个连接反应的体系有问题。
⑸ DNA胶回收出现非目的带,是什么原因
胶回收出现非目的带,只能是切胶的时候切得太宽了,或者原来在分离胶就没有跑开。
分离胶浓度不合适,电泳条件不合适都可能导致分离效果不好。
重新跑下分离胶,只要条件合适,分离开了,切得时候仔细点,后面都不会出现问题。
⑹ 本人菜鸟 想问核酸电泳完成后为什么要进行切胶回收 要是没有跑出来为什么也要回收
您好!
① 切胶回收的样品一般包括PCR产物和各种酶切产物,回收用于连接进行质粒构建等。
② 电泳没有跑出来,可能是电泳的问题。。。好歹把样品留着吧。。。
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⑺ 为什么切胶回收
因为想要“纯化目的片段”,不想有里面有各种酶、缓冲体系 及一些非目的片段啊!
⑻ 胶回收异丙醇的目的
异丙醇用于沉淀DNA...
用异丙醇代替无水乙醇能更好地去除多糖的影响
多糖的污染具体表现为有机版溶剂沉淀时权,沉淀很多,但复溶时,大量沉淀不溶,电泳观察时核酸含量很低
影响不大,可用到0.6-1体积
⑼ 为什么DNA需要回收
如果你是指的切胶回收,是因为一个DNA样品中有可能混有多个不同大小的DNA片段,我们需要通过电泳将这些片段分离开,再将含有目的DNA片段的胶切下来回收其中的DNA片段,达到纯化的目的。
⑽ 为什么要有胶回收
防止污染以及材料浪费 谢谢~^_^